分享一篇发表在Nature Chemical Biology上的文章，文章题目为“Selective bioorthogonal probe for N-glycan hybrid structures”，本文通讯作者为美国国立卫生研究院细胞与分子生物学实验室的John A. Hanover，他们课题组的主要研究方向为O-GlcNAc修饰如何影响细胞信号传导、基因表达和表观遗传学。

作者认为在GlcNAlk的6位添加对甲苯磺酰基（Tosyl）可以增加底物的疏水性从而增加膜通透性，而且先前的研究表明，D-半乳糖的6-OTs衍生物在结构上与酶结合的中间产物类似，可以被进一步代谢。因此作者通过合成得到了GlcNAlk的衍生物MM-JH-1。实验表明MM-JH-1可以在细胞中产生很好的标记信号，且标记信号依赖于蛋白活性。检测细胞的代谢产物可以看到UDP-MM-JH-1的存在。作者通过实验确定了MM-JH-1选择性地标记在蛋白上而不是脂质、RNA或GPI锚蛋白中。分别使用抑制O-糖基化或者N-糖基化相关酶的抑制剂处理细胞再用MM-JH-1代谢标记，作者发现N-糖基化相关酶的抑制剂处理细胞会导致MM-JH-1标记信号显著下降，说明MM-JH-1是以酶促的方式选择性地掺入N-连接聚糖中。

为了进一步确定MM-JH-1掺入的N-糖类型，作者使用不同的N-糖加工酶的抑制剂，检测不同抑制剂对MM-JH-1标记信号的影响，最终确定MM-JH-1选择性地掺入杂合型N-糖中，质谱实验也证明了这一点。之后，作者通过敲低、回补实验证实了MM-JH-1是经MGAT1催化代谢标记到杂合型N-糖上的。在实验过程中，作者发现MM-JH-1会在细胞核中产生标记信号，这是此前未被发现的一点，因此作者着重研究了核仁中MM-JH-1的标记信号，发现MM-JH-1主要是标记在纤维蛋白上，并尝试探究了MM-JH-1修饰在细胞核的纤维蛋白上的机制。

综上所述，作者开发了一种用于检测杂合型N-糖修饰的生物正交探针。