Angew. Chem. :特异性识别耐高温生物标志物的新型核酸探针用于具核梭杆菌的精准检测

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具核梭杆菌是一种存在于人类口腔、胃肠道和生殖道的细菌,具有较强的致病性,是引起牙周疾病和胃肠道疾病的重要病原菌,还与不良妊娠和结直肠癌等疾病有关。目前,具核梭杆菌的检测方法主要有细菌培养法和聚合酶链式反应法。然而,这些方法存在操作复杂、耗时长和成本高等问题。因此,需要发展简便的具核梭杆菌的检测方法。


近日,加拿大麦克马斯特大学的李应福教授和Bruno J. Salena教授合作设计了识别耐高温蛋白质的新型核酸探针,有效排除其他蛋白质的干扰,实现具核梭杆菌的精准检测。


作者首先对具核梭杆菌的细胞外粗提物进行90摄氏度加热15分钟,排除不耐高温的蛋白质的干扰,然后利用指数富集配体系统进化技术,筛选能在具核梭杆菌的耐高温的生物标志物的存在下,特异性切割底物的核酸酶。随后,通过理论模拟和实验结果分析,作者得出了该核酸分子的二级结构,以及核心区域,并发现该区域富含A和T,占比高达91.7%,目前还未报道过这样的核酸酶。



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随后,作者证实了该核酸酶也能够识别细胞内粗提物,并且验证了目标物是分子量约为50,000道尔顿的耐高温蛋白质。研究表明该核酸探针对具核梭杆菌具有很好的特异性,甚至能区分其分型,在唾液和粪便中也能检测具核梭杆菌。


该工作通过加热使大部分蛋白目标物失活,结合体外筛选,有利于发现新的生物标志物,并且排除了其他蛋白质的干扰,从而简化了筛选步骤,发展了一种简便、准确的细菌检测方法。

文信息

A Fluorogenic DNAzyme for A Thermally Stable Protein Biomarker from Fusobacterium nucleatum, a Human Bacterial Pathogen

Qian Feng, Sandy Zakaria, Devon Morrison, Dr. Kha Tram, Jim Gu, Prof. Dr. Bruno J. Salena, Prof. Dr. Yingfu Li

文章的第一作者是麦克马斯特大学李应福教授的硕士生Qian Feng。


Angewandte Chemie International Edition

DOI: 10.1002/anie.202306272




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