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显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
通用显色剂
硫酸 常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110℃烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
0.5%碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色。
碘/硅胶 把碘和硅胶混合在密闭容器中静置,显色的时候直接把TLC放进去即可
磷钼酸 5 g 磷钼酸+100 mL 乙醇。喷后120℃(可用加热枪)缓慢烘烤
钼酸铈 235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸
中性0.05%高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;
溶液II:5%碳酸钠溶液;
溶液I和溶液II等量混合应用。
酸性高锰酸钾试剂 喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180℃加热15~20min。
酸性重铬酸钾试剂 喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150℃烤薄层。5%磷钼酸乙醇溶液喷后120℃烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
专属性显色剂
由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:
(1) 烃类
硝酸银/过氧化氢
检出物:卤代烃类
溶液:硝酸银0.1g溶于水1ml,加2-苯氧基乙醇l00ml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;
结果:斑点呈暗黑色。
荧光素/溴
检出物:不饱和烃
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇100ml;II.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
四氯邻苯二甲酸酐
检出物:芳香烃
溶液:2%四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10:1)的溶液。
方法:喷后置紫外光下观察。
甲醛/硫酸
检出物:多环芳烃
溶液:37%甲醛溶液0.2ml溶于浓硫酸l0ml。
(2) 醇类
3,5-二硝基苯酰氯
检出物:醇类
溶液:I.2%本品甲苯溶液;II.0.5%氢氧化钠溶液;III.0.002%罗丹明溶液。
方法:先喷(I),在空气中干燥过夜,用蒸气薰2min,将纸或薄层通过试液(II)30s,喷水洗,趁湿通过(III)15s,空气干燥,紫外灯下观察。
硝酸铈铵
检出物:醇类
溶液:I.1%硝酸铈铵的0.2mol/L硝酸溶液;II.N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128ml+25ml+1.5ml)混合液中,用前将(I)与(II)等量混合。喷板后于105℃加热5min。
香草醛/硫酸
检出物:高级醇、酚、甾类及精油。
溶液:香草醛1g溶于硫酸100ml。
方法:喷后于120℃加热至呈色最深。
(3) 醛酮类
品红/亚硫酸
检出物:醛基化合物
溶液:I.0.01%品红溶液,通入二氧化硫直至无色;II.0.05mol/L氯化汞溶液;III.0.05mol/L硫酸溶液。
方法:将I、II、III以1:1:10混合,用水稀释至l00ml。
邻联茴香胺
检出物:醛类、酮类。溶液:本品乙酸饱和溶液。
2,4-二硝基苯肼
检出物:醛基、酮基及酮糖。
溶液:I.0.4%本品的2mol/L盐酸溶液;II.本品0.1g溶于乙醇l00ml中,加浓盐酸lml。
方法:喷溶液I或II后,立即喷铁氰化钾的2mol/L盐酸溶液。
结果:饱和酮立即呈蓝色;饱和醛反应慢,呈橄榄绿色;不饱和羰基化合物不显色。
(4) 有机酸类
溴甲酚绿
检出物:有机酸类
溶液:溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。
方法:浸板。
结果:蓝色背景产生黄色斑点。
高锰酸钾/硫酸
检出物:脂肪酸衍生物。
溶液:见通用显色剂酸性高锰酸钾。
过氧化氢
检出物:芳香酸。溶液:0.3%过氧化氢溶液。
方法:喷后置紫外光(365nm)下观察。
结果:呈强蓝色荧光。
(5) 酚类
氯化铁
检出物:酚类、羟酰胺酸。
溶液:1%~5%氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。
结果:酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。
(6) 胺类
茚三酮
检出物: 氨基酸
溶液: 1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
硝酸/乙醇
检出物:脂肪族胺类
溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。
方法:需要时120℃加热。
硫氰酸钴(II)
检出物:生物碱、伯、仲、叔胺类
溶液:硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。
结果:白色至粉红色背景上呈蓝色斑点,2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内,可重现色点。
1,2-萘醌-4-磺酸钠
检出物:芳香胺类
溶液:本品0.5g溶于95ml水,加乙酸5ml,滤去不溶物即得。
方法:喷后反应30min显色。
葡萄糖/磷酸
检出物:芳香胺类
溶液:葡萄糖2g溶于85%磷酸l0ml与水40ml混合液中,再加乙醇与正丁醇各30ml。
方法:喷后于115℃加热l0min。
(7) 硝基及亚硝基化合物
α-萘胺
检出物:3,5-二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺
溶液:I.0.5% α-萘胺乙醇溶液;II.10%氢氧化钾甲醇溶液。
方法:先喷溶液I,再喷溶液II。结果:呈红褐色斑点。
二苯胺/氯化钯
检出物:亚硝胺类
溶液:1.5%二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2%氯化钠溶液100ml,按5:1混合。
方法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。结果:显紫色斑点。
(8) 生物碱
硫酸铈 10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
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